项目介绍

细胞ROS（活性氧种）检测是一种用于测定细胞内活性氧种含量的实验方法。活性氧种是细胞代谢过程中产生的一类化学性质活泼的含氧分子，包括超氧阴离子（O2-）、过氧化氢（H2O2）、羟基自由基（·OH）等。它们在细胞信号传导、免疫反应等生理过程中发挥重要作用，但过量时会导致细胞损伤、DNA突变，甚至细胞死亡。

常用方法

1. 化学荧光探针法

Dihydroethidium (DHE)：可以穿透细胞膜，被超氧阴离子氧化后产生红色荧光；

2’,7’-Dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA)：进入细胞后，被ROS氧化成2’,7’-dichlorofluorescein (DCF)，在荧光显微镜下呈现绿色荧光；

Hydroethidine (HE)：类似DHE，用于检测超氧阴离子；

2. 电子自旋共振（ESR）光谱法

通过检测样品中的自由基含量来间接评估ROS的水平（此方法需要专门的设备和专业知识）；

3. 酶联免疫吸附试验（ELISA）

使用特定的抗体检测细胞提取物中的ROS相关代谢产物；

4. 高效液相色谱（HPLC）或气相色谱-质谱（GC-MS）

这些方法可以定量分析细胞内ROS相关的化学物质。

基本步骤

1. 细胞培养：在适当的条件下培养细胞至所需密度；

2. 处理细胞：如果实验设计需要，可以使用某些试剂或条件处理细胞以诱导ROS的产生；

3. 加载探针：将ROS特异性荧光探针加入细胞培养液中；

4. 孵育：在适当条件下孵育细胞，使探针进入细胞并与ROS反应；

5. 洗涤：去除未进入细胞的探针；

6. 检测：使用荧光显微镜或荧光分光光度计检测荧光信号；

7. 数据分析：分析荧光强度，以评估细胞内ROS的水平。

注意事项

1. 确保实验过程中避免光照和氧化的影响，因为这些因素可能改变ROS的浓度；

2. 使用适当的阳性对照和阴性对照来验证实验的有效性；

3. 考虑到不同的ROS探针可能对不同类型的ROS有选择性，选择合适的探针非常重要；

4. 细胞ROS检测在研究氧化应激、细胞凋亡、炎症和许多疾病的发生机制中具有重要作用。

提供信息

1. 客户是否提供细胞，流式检测尽量活细胞，免疫荧光检测也需活细胞；

2. 需要流式检测还是免疫荧光检测；

3. 对流式结果分析是否有需求。

测试价格

1. 细胞株 400/株，贴壁细胞80元培养至6孔细胞量，悬浮细胞100元培养至6孔细胞量；客户提供300/株适应性培养1-2周；

2. 药物处理费用一个药物150，载体转染费用一个载体60；

3. 流式ROS费用100细胞/重复，建议三重复；免疫荧光ROS费用单标检测 40元/片，荧光分析 20/套。