蛋白质/多肽概念
蛋白质和多肽是由20种氨基酸按照一定的顺序通过肽键连接成长链,然后通过链内、链间的离子键、疏水作用等多种作用力进行折叠卷曲形成一定的构象并发挥其独特作用。氨基酸的排列顺序即蛋白质的一级结构,这决定了蛋白质的高级结构及功能。基于LCMS/MS平台,可以很好的解析蛋白质一级结构。
蛋白质通过胰蛋白酶等多种酶切后,裂解成多种小分子多肽片段。本公司使用NanoLC-Obitrap 质谱仪对多肽片段进行解析,样品被离子化后进入质谱仪,得到一级质谱图后,筛选母离子进行二级质谱图解析肽段序列。
最后综合分析比对得出蛋白质的一级氨基酸序列。对于蛋白质的高级结构,圆二色谱可以解析a螺旋,b折叠等蛋白组二级结构。而蛋白质三级及更高的空间结构,则可以用晶体法、核磁共振波谱以及冷冻电镜来解析,从而揭示蛋白质的活性机理。
蛋白质的一级结构可以用氨基酸测序;蛋白质二级、三级结构可以用核磁一维(氢谱,碳谱,DEPT135)、核磁二维(HMBC、 HSQC、HHCOSY、NOESY 、NOE)、圆二色谱、LCMS/MS平台、飞行时间质谱质谱、数据解析。
蛋白质/多肽结构解析
多肽结构解析